紫外可見(jiàn)分光光度計是由光源、單色器、吸收池、檢測器和信號處理器等部件組成。光源的功能是提供足夠強度的、穩定的連續光譜。

　　分子的紫外可見(jiàn)吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見(jiàn)輻射光后，發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構，其吸收光能量的情況也就不會(huì )相同，因此，每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線(xiàn)，可根據吸收光譜上的某些特征波長(cháng)處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎。

　　選擇紫外可見(jiàn)分光光度計的原因

　　光學(xué)構造

　　一般來(lái)說(shuō)，紫外光分光光度計分為單光束和雙光束兩類(lèi)。顧名思義，單光束型主要是依賴(lài)單束光進(jìn)行測量。一束給定波長(cháng)的光通過(guò)對照物，然后再通過(guò)實(shí)際樣品溶液，就能得到吸光結果。

　　雙光束型則是通過(guò)一個(gè)斬光輪將一束光分成兩束，分別測量對照樣品和實(shí)際樣品?？梢宰钚』馄坪蜏p少測量時(shí)間。一些雙光型光度計不利用斬光輪，而是利用一種光束分光器來(lái)代替，將一束光分成兩束平行的光然后同時(shí)測量對照樣品和目的樣品。因為增加了測量的速度，所以雙光束分光光度計在測量一些溶液隨時(shí)間動(dòng)態(tài)變化的研究中大有用處。

　　光源和檢測方法

　　分光光度計的光譜也是需要考慮的一個(gè)重要因素。實(shí)驗室研究人員希望省錢(qián)購入專(zhuān)門(mén)儀器定量核酸、蛋白或者細菌的生長(cháng)情況。

　　紫外分光光度計一般覆蓋190nm和380nm波長(cháng)，通常利用氘燈照明。一些特殊的儀器可以提供滿(mǎn)足光子學(xué)和半導體研究需要的光譜范圍。

　　一些儀器具有多種光源供選擇：紫外光、可見(jiàn)光和甚至紅外光(780 nm 至3,000 nm)。鎢燈和鹵素燈一般只覆蓋可見(jiàn)光部分(大約380 nm 到800 nm)。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見(jiàn)光區域。

　　分光光度計的帶寬(bandwidth)很大程度上依賴(lài)于單色儀的狹縫的寬度?？梢酝渡涑鰧?shí)驗精確要求的光譜。一種嚴格帶寬使得儀器能對復雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光測量?？勺兊膯紊珒x的狹縫寬度能使一臺分光光度計滿(mǎn)足多種實(shí)驗需要。

　　為了測量吸光值，分光光度計制造商通常使用光電倍增管和光敏二極管。PMTs提供快速的反應時(shí)間和良好的靈敏度，并且可以在紫外光譜調節至特定的范圍。但一些制造商依賴(lài)于光敏二極管的動(dòng)態(tài)范圍在數秒內行使所有的光譜測量。

　　樣品類(lèi)型

　　在大部分的樣品類(lèi)型中，分光光度計可接受樣品孔、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板。微孔板主要是滿(mǎn)足高通量的需要和大規模的實(shí)驗室需求。但盡管對于小實(shí)驗室來(lái)說(shuō)，制造商仍然提供了多種容器轉換器來(lái)滿(mǎn)足通量的要求和減少實(shí)驗時(shí)間。

　　用小試管cuvette裝樣品容量一般從1 μl-5ml，并且一些儀器裝備了各種樣品固定物來(lái)滿(mǎn)足各種改變需要。體現了柔韌性。

　　數據管理

　　大部分單機型的分光光度計包含了驅動(dòng)儀器運行和管理數據的軟件。高性能的儀器，通常與PC機一起聯(lián)用，需要從制造商提供額外的軟件。同時(shí)用戶(hù)也可以選擇升級軟件以滿(mǎn)足他們的需要。